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高通量组织研磨仪研磨破碎肿瘤组织细胞的实验步骤

发布时间:2017/05/31 点击量:

实验目的

研磨破碎肿瘤组织细胞(如胰腺、肺、肝等器官的肿瘤组织),后续提取其RNA。

实验原理

通过研磨珠撞击肿瘤组织细胞,使其细胞膜破裂,其内的RNA暴露。

实验材料和器具

样品:肿瘤组织细胞

仪器:高通量组织研磨仪(上海净信,Tissuelyser-48)

耗材:离心管(上海净信,0.4研磨单位),研磨珠(上海净信,3号)

实验步骤

1.取组织块解冻,用生理盐水洗去血污,剪取约0.5g组织,剪小放入0.4研磨单位离心管中;

2.加入一粒6号的研磨珠,(如果用0.3研磨单位的离心管,加入三或五粒的3号的研磨珠),加入0.09体积 TES混匀,再加入0.01ml SDS(10%),0.001ml蛋白酶K(20mg/ml),充分混匀;

3.离心管放入研磨机中,设置参数13单位振频,60秒,程序结束即可得到破碎原液;

4.完成后续RNA提取步骤。

实验结果

胰腺实验

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