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对样品植物DNA的提取实验步骤

发布时间:2018/10/22 点击量:

实验步骤

方法1  湿磨法

1.取打碎机适配器于-80°冷冻约15min。

2.取一指节长度的花序,尽量带上一片叶子,(材料量可多可少,7d大小的苗地上部分也能提出RNA),放入国产2ml EP管中,加一粒钢珠,液氮速冻。之后用镊子取出,快速加入适配器中。(尽量用国产的EP管即可,进口的管子液氮冻过后,容易裂)

3.打碎15s,10单位频振。(水稻嫩叶为。45S,12单位频振 老叶为,70S   12单位频振 )

4.将材料再次放入液氮中。

5.用磁铁吸出钢珠,加入1研磨单位Trizol,余下步骤即正常的RNA提取步骤。

方法2  干磨法

1.取一指节长度的花序(材料量可多可少,7d大小的苗地上部分也能提出RNA),放入国产2研磨单位EP管中,加一粒钢珠,400ul Trizol。

2.打碎1min 10单位频振(水稻嫩叶为。45S,2单位频振   老叶为,70S   2单位频振 ) 。

3.吸出钢珠,补0.12mlTrizol。

4.余下步骤即正常的RNA提取步骤。

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